А.И. Полинова, Д.Р. Загирова, Л.Ју. Кокаева, И.И. Бушко, И.В. Леванцевич, С.Н. Елански
Во последниве години, фитосанитарната состојба на насадите на компири и семенскиот фонд значително се влоши во Белорусија. Улогата на одделните видови штетници и нивниот сооднос во агрофитоценозите е променета. Зголемена е штетноста на многу не само раширени болести (доцна лошо влијание, алтернарија, сите видови краста, бактериоза, суво гниење од фузариум), туку и нови кои не се доволно проучени, како што е водено гниење на раната (сл. 1). Оваа болест, пронајдена во Индија, Централна Азија и други јужни земји, беше забележана во регионите Гомел, Брест, Гродно и Минск во Белорусија. Како и другите оомицети кои живеат во почвата, P. ultimum предизвикува масивни лезии во услови на прекумерна влага - во слабо исцедени области, при долготрајни дождови (Taylor et al., 2008).
Во Белорусија, ширењето на болеста беше забележано во години со зголемени температури во текот на сезоната на растење: во некои серии компири беа погодени 8-10% од клубени. Раното водено гниење на клубени може да предизвика значителна штета, што е предизвикано од недостатокот на отпорни сорти, развиените заштитни мерки и брзиот развој на болеста кога се оштетуваат клубени (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). Оваа болест влијае само на клубени. Во Русија, раната водена гниење сè уште не е од значајна важност.
Во оваа работа, проучувавме 4 соеви на патогени на рани водени гнили изолирани од погодените клубени од компири од сортите Вектар белоруски, Скарб и селекционите хибриди во складиштата на Научниот и практичниот центар на Националната академија на науките на Белорусија за компири и хортикултура. (Регионот Минск). Целите на студијата вклучуваа определување на видот на изолираните изолати, нивната вирулентност против клубени од компир, проценка на растот на различни температури на околината и отпорност на металаксил.
Мицелиумот на изолатите се одгледува на течен медиум за грашок (180 g замрзнат зелен грашок се вари 10 минути во 1 литар дестилирана вода, а потоа се автоклавува 30 минути на 1 atm); Од секој сој беше изолирана ДНК. За да се изолира ДНК, замрзнатиот мицелиум беше сомелен во течен азот, лизиран во CTAB пуфер, а потоа депротеинизиран со хлороформ. ДНК беше складирана во дејонизирана вода на -20°C. Анализата на нуклеотидните секвенци на регионите на геномот специфични за видовите (региони на нуклеарните рибозомални гени 18S и 5,8S, како и внатрешниот транскрибиран меѓугенски простор ITS1), засилени со помош на прајмери ITS1 и ITS2 (White, 1990), покажа дека испитуваните соеви припаѓале на видот Pythium ultimum Trow. (синоним Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
Сите проучувани соеви влијаеле на парчиња клубени од компир од сортата Гала сместени во влажни комори. На нив се формираа темни дамки, кои подоцна се претворија во влажни, длабоко продирачки чирови (сл. 2). Инфекцијата беше спроведена со поставување на мицелиум P. ultimum во центарот на парче клубенот.
Инокулираните клубени дискови се инкубираат на температура од +22°C. Максималната стапка на раст на погодената област беше забележана во првите 2 дена, тогаш областа на чирот практично не се промени.
Оваа шема беше точна за сите испитувани видови.
Стапката на раст на соевите беше проценета на медиум за овес агар на температури од 5, 15, 24 и 34°C (сл. 3). Растот е забележан на сите температури; максималната стапка на раст беше забележана на 24°C (чаша од 86 mm беше целосно обрасната за 2 дена). На 15 и 34°C, стапката на раст беше значително помала (чашата беше обрасната за 4 и 3 дена, соодветно).
На температури од 15, 24 и 34°C, стапките на раст на сите проучувани соеви не се разликуваат. На температура од 5°C, сојот P1 растеше значително побрзо од другите (20 mm на 4-тиот ден), P4 - нешто побавно (10 mm на 4-тиот ден), P2 и P3 практично не растеа.
Исто така, треба да се забележи дека на температура од 24 ° C, растот започна веднаш по садењето на садот на температури од 15 и 34 ° C имаше задоцнување во почетокот на активниот раст за 1 ден, а на 5 ° C; – за 2 дена.
Металаксил (и неговиот изомер мефеноксам) се препознаваат како најефективни лекови за контрола на оомицетите на почвата. Металаксил е способен да навлезе во клубени и да обезбеди (дури и во многу ниски концентрации) нивна долготрајна заштита (Taylor et al., 2008, Bruin et al., 1982). Сепак, ефективноста на металаксил нагло се намалува по појавата на резистентни соеви кај популациите. Високо отпорни соеви се пронајдени во неколку региони на Соединетите Американски Држави (Taylor et al., 2002). Нема податоци за отпорноста на белоруските соеви на P. ultimum кон металаксил, и затоа беше одлучено да се тестира нивната отпорност на лекот во оваа работа.
Студија за чувствителност на фунгицидот металаксил беше спроведена на медиум од овес агар со додавање на фунгицид во различни концентрации (Побединскаја, Елански, 2014).
Проучените соеви имаа одредени разлики во отпорноста на металаксил (Табела 1). Така, при концентрација на фунгицид од 1 mg/l, растот на сојот P4 целосно запре, а растот на преостанатите соеви беше значително забавен. Видовите P1 и P2 растеа многу бавно на медиум со концентрација на металаксил од 10 mg/l. Пресметаната ефективна концентрација на EC50 (концентрација на фунгицид што ја забавува стапката на раст на сојот за 2 пати во однос на контролната) за сите соеви беше помала од 1 mg/l. Така, сите тестирани соеви беа подложни на металаксил; се покажал како високо ефикасен во инхибиција на растот на P. ultimum.
Според Бруин и сор. (1982) по третирањето на растенијата во текот на сезоната на растење со металаксил во доза од 0,5 kg/ha, акумулацијата на фунгицидот кај клубени беше 0,055 μg/g во перидермот, 0,022 μg/g во кортикалниот слој и 0,034 μg/g во централниот дел на клубенот. Според нашите податоци, оваа концентрација на металаксил не е доволна за да се спротивстави на болеста, но може да го забави нејзиниот развој.
Кога се одгледувале на овесна средина, сите соеви формирале ооспори во монокултурата (сл. 4), што е типично за P. ultimum. Парното спојување на соеви не откри видливи симптоми на вегетативна некомпатибилност - садовите беа рамномерно покриени со мицелиум.
Добиените податоци покажуваат дека P. ultimum е фитопатоген способен за брз раст при широк опсег на температури, вклучително и на температура на складирање од 5°C. Тој е вирулентен за ткивата на клубенот од компир и формира ооспори способни за долгорочна одржливост. Така, видот е опасен фитопатоген кој може да претставува закана за земјоделството и бара дополнителна студија.
Истражувањето беше спроведено со поддршка на Руската научна фондација (проект N 14-50-00029).
Табела 1. Чувствителност на соевите на P. ultimum на металаксил
Вирус | Концентрација на металаксил, mg/l | ||
0 (контрола) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Забелешка Дадени се просечни податоци за 3 мерења.
Написот е објавен во списанието „Заштита на компир“ (бр. 1, 2017 година)